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地衣芽孢桿菌檢驗操作步驟有哪些

發(fā)表時間:2024-08-28 11:49

地衣芽孢桿菌檢驗操作步驟


固體和半固體樣品:




稱取25g樣品,置于225mL生理鹽水的無菌均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打lmin~2min制成1:10的樣品勻液;或置于盛有225mL滅菌生理鹽水的無菌均質(zhì)杯中,8000r/min~10000r/min均質(zhì)lmin~2min制成1:10的樣品勻液。




液體樣品在深入探索液體樣品的奧秘時,我們不得不提及其多樣化的來源與廣泛的應(yīng)用。從自然界中純凈的泉水、深邃海洋的波濤,到工業(yè)領(lǐng)域精密儀器中的冷卻液、實驗室里精心調(diào)配的化學(xué)試劑,每一種液體樣品都承載著獨特的信息與故事。


隨著科技的不斷進步,對液體樣品的分析技術(shù)也日益精湛。高分辨率質(zhì)譜儀能夠揭示液體中微量成分的存在,而光譜分析則能精準描繪出分子的振動與轉(zhuǎn)動特性,為科研工作者打開了一扇窺視微觀世界的大門。此外,納米技術(shù)的發(fā)展更是讓液體樣品的檢測達到了前所未有的精度,使得我們能夠在分子甚至原子層面進行操控與觀測。


然而,液體樣品的處理與保存也是一項不容忽視的挑戰(zhàn)。溫度、光照、氧氣暴露等因素都可能對樣品的性質(zhì)產(chǎn)生顯著影響,因此,在采集、運輸、存儲乃至分析的全過程中,都需要嚴格遵守既定的操作規(guī)程,以確保樣品的真實性與代表性。


展望未來,隨著大數(shù)據(jù)、人工智能等前沿技術(shù)的融合應(yīng)用,液體樣品分析將步入一個全新的智能化時代。通過構(gòu)建復(fù)雜的算法模型,我們不僅能快速準確地解析出樣品中的成分與結(jié)構(gòu),還能預(yù)測其未來的變化趨勢,為環(huán)境保護、食品安全、疾病診斷等領(lǐng)域提供更加有力的支持。


總之,液體樣品作為自然界與人類社會交織的紐帶,其研究價值與應(yīng)用前景不可估量。隨著科技的不斷前行,我們有理由相信,關(guān)于液體樣品的更多未知將被揭開,更多奇跡將在這一領(lǐng)域誕生。




應(yīng)先將其充分搖勻后,以無菌吸管吸取樣品25mL放入裝有225mL生理鹽水的無菌錐形瓶(瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠)中,充分振搖﹐制成1:10的樣品勻液。




樣品稀釋:




用1mL無菌吸管或微量移液器吸取l:10樣品勻液lmL,沿管壁緩慢注于裝有9mL生理鹽水的無菌試管中(注意吸管尖端不要觸及稀釋液),振搖試管或換用1支無菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻,制成l:100的樣品勻液。




另取1mL無菌吸管或微量移液器吸頭,按上述操作順序,做10倍遞增樣品勻液,每遞增稀釋一次,即換用1次lml滅菌吸管或吸頭。




培養(yǎng):




根據(jù)對待檢樣品菌含量的估計,選擇2個~3個連續(xù)的適宜稀釋度﹐每個稀釋度水浴80℃±l℃維持10min,吸取菌液0.2 mL接種于營養(yǎng)瓊脂平板內(nèi),使用涂布棒盡可能小心快速地涂布接種液于瓊脂表面,涂布棒不得接觸平皿邊緣。每個稀釋度接種2個平板。涂布后,將平板靜置10min使接種物完全被培養(yǎng)基吸收。翻轉(zhuǎn)平皿置于37℃±1℃厭氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h±2h。




菌落計數(shù):




選取特征菌落數(shù)在20CFU~200CFU之間、無蔓延菌落生長的平板計數(shù)菌落總數(shù)。低于20CFU的平板記錄具體菌落數(shù),大于200CFU的可記錄為多不可計。每個稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個平板的平均數(shù)。




其中一個平板有較大片狀菌落生長時,則不宜采用,而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù);若片狀菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均勻,即可計算半個平板后乘以2,代表一個平板菌落數(shù)。




當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無明顯界線的鏈狀生長時,則將每條單鏈作為一個菌落計數(shù)。




菌落挑選和純培養(yǎng):




挑選平板上5個白色不透明、濕潤、邊緣光滑的菌落分別轉(zhuǎn)入營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基37℃±1℃厭氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h±2h后進行形態(tài)學(xué)、生化鑒定。




形態(tài)學(xué)鑒定:




革蘭氏染色,鏡檢。地衣芽孢桿菌為革蘭氏陽性桿菌,呈桿狀,長度1.5u.m~3.5um,單個、成對或短鏈狀排列,有芽孢,芽孢橢圓形,中生或近中生,芽孢囊不明顯膨大。




生化鑒定:




使用細菌生化鑒定試劑盒進行生化鑒定。


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