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小鼠脂聯(lián)素(ADP)elisa試劑盒操作步驟發(fā)表時(shí)間:2023-07-12 13:38 小鼠脂聯(lián)素(ADP)elisa試劑盒操作步驟 1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。 2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。 3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。 5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 7. 溫育:操作同3。 8. 洗滌:操作同5。 9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。 11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。 大提柱式酵母DNAout(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品) 大提柱式真菌DNAout 酵母DNAout(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品) 溶壁酶(破壁酶)干粉 蝸牛酶干粉 消解酶(溶細(xì)胞酶)干粉 真菌DNAout 柱式真菌DNAout 細(xì)胞器DNA提取 絲狀真菌線粒體DNAout 線狀DNA清除劑 柱式動(dòng)物線粒體DNAout,PCR級(jí) 柱式動(dòng)物線粒體DNAout,測(cè)序級(jí) 柱式昆蟲mtDNAout,測(cè)序級(jí)(停產(chǎn)) 柱式血液mtDNAout,測(cè)序級(jí)(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品) 柱式植物mtDNAout,測(cè)序級(jí)(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品) 柱式植物葉綠體DNAout 細(xì)菌DNA提取 Southern級(jí)細(xì)菌(G+)DNAout(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品) Southern級(jí)細(xì)菌(G-)DNAout(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品) 百萬堿基級(jí)細(xì)菌(G+)DNAout(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品) 百萬堿基級(jí)細(xì)菌(G-)DNAout(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品) 大提柱式土壤DNAout 大提柱式細(xì)菌DNAout 大提柱式細(xì)菌DNAout(含溶菌酶) |
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