大鼠食管組織提取物實驗報告

大鼠食管組織提取物實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

羊抗雞IgG (抗血清) Anti-Chicken IgG antibody produced in ... 1ML 免疫血清

兔抗雞IgG (抗血清) Anti-Chicken IgG antibody produced in ... 1ML 免疫血清

兔抗地高辛 (抗血清) Anti-Digoxin antibody produced in rabbit 1ML 免疫血清

羊抗狗IgG (抗血清) Anti-Dog IgG antibody produced in goat 1ML 免疫血清

兔抗狗IgG (抗血清) Anti-Dog IgG antibody produced in rabbit 1ML 免疫血清

驢抗羊IgG (抗血清) Anti-Goat IgG antibody produced in don... 1ML 免疫血清

兔抗羊IgG (抗血清) Anti-Goat IgG antibody produced in rab... 1ML 免疫血清

兔抗豚鼠IgG (抗血清) Anti-Guinea Pig IgG antibody produced ... 1ML 免疫血清

羊抗馬IgG (抗血清) Anti-Horse IgG antibody produced in goat 1ML 免疫血清

兔抗馬IgG (抗血清) Anti-Horse IgG antibody produced in ra... 1ML 免疫血清

羊抗人白蛋白 (抗血清) Anti-Human Albumin antibody produced i... 1ML 免疫血清

兔抗人白蛋白 (抗血清) Anti-Human Albumin antibody produced i... 1ML 免疫血清

羊抗人C3 (抗血清) Anti-Human C3 antibody produced in goat 1ML 免疫血清

羊抗人纖維蛋白原 (抗血清) Anti-Human Fibrinogen produced in goat 1ML 免疫血清

兔抗人纖維蛋白原 (抗血清) Anti-Human Fibrinogen produced in rabbit 1ML 免疫血清

羊抗人IgA血清 (α鏈特異) Anti-Human IgA (α-chain spec.) produc... 1ML 免疫血清

羊抗人IgA (抗血清) Anti-Human IgA antibody produced in goat 1ML 免疫血清

兔抗人IgA (抗血清) Anti-Human IgA antibody produced in ra... 1ML 免疫血清

兔抗人IgG～Fc (抗血清) Anti-Human IgG (Fc spec.) produced in ... 1ML 免疫血清

羊抗人IgG (抗血清) Anti-Human IgG antibody produced in goat 1ML 免疫血清

兔抗人IgG (抗血清) Anti-Human IgG antibody produced in ra... 1ML 免疫血清