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大鼠血管組織提取物細(xì)胞處理發(fā)表時(shí)間:2022-10-13 15:53 大鼠血管組織提取物細(xì)胞處理: 1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。凍存培養(yǎng)基 凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。 1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。 大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠氣管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠氣管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠肺成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠支氣管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠支氣管成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠胰島細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠胰腺星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠頜下腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠腮腺細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠乳腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠胰腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 |
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