小鼠硒蛋白M(SELM)ELISA試劑盒操作步驟

小鼠硒蛋白M(SELM)ELISA試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

小鼠白介素-27(mouse IL-27)

小鼠胰島素(mouse Insulin)

小鼠抑制素A(mouse Inhibin A)

小鼠抑制素B(mouse Inhibin B)

小鼠IP-10(mouse IP-10)

小鼠8異前列腺素(mouse 8-iso-PG)

小鼠白三烯B4(mouse LTB4)

小鼠瘦素(mouse Leptin)

小鼠瘦素受體(mouse Leptin receptor)

小鼠促黃體生成激素(mouse LH)

小鼠溶菌酶(mouse Lysozyme)

小鼠巨嗜細(xì)胞趨化蛋白-1(mouse MCP-1)

小鼠MCP-3(mouse MCP-3)

小鼠M-膽堿能受體結(jié)合力(mouse MCBC)

小鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(mouse MDC)

小鼠髓過氧化物酶(mouse MPO)

小鼠粘蛋白(mouse MUC5AC)

小鼠肌肉生成抑制素(mouse Myostatin)

小鼠巨噬細(xì)胞游走抑制因子(mouse MIF)

小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白-1(mouse MIP-1)

小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白-2(mouse MIP-2)

小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白-3a(mouse MIP-3a)

小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白-3β(mouse MIP-3β)

小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白-1a(mouse MIP-1a/CCL3)

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-1(mouse MMP-1)

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-2(mouse MMP-2)