雞血清一氧化氮elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟

雞血清一氧化氮elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

黃荊子

肉蓯蓉（管花肉蓯蓉）

沙苑子

阿膠

半夏

槐米

燈盞細(xì)辛(燈盞花)

紫花杜鵑

博落回

了哥王

蜂房

重樓(云南重樓)

白附子（獨(dú)角蓮）

青皮

蘆竹根

雞內(nèi)金

崗梅

花錨

芥子

蘆薈

地膚子

地膽草

江南卷柏

白茅根

白果

白屈菜

半邊蓮

巴豆

毛冬青

天冬

山楂（山里紅）

山藥

山麥冬

廣藿香

人參蘆頭

松葉

蟾酥

鶴虱

薤白

藁本(遼藁本)

藁本

錦燈籠

地蜈蚣

旋復(fù)花

桑白皮

桑葉

凌霄花

蓮子

香櫞

南鶴虱

南五味子

茯苓

卷柏(卷柏)

金櫻根

金蕎麥

佩蘭

明黨參

苦楝皮

雞冠花

伸筋草

扶芳藤

蘆根

花椒(青椒)

麥芽

卷柏(墊狀卷柏)

紅芪

紅大戟

肉蓯蓉

百合

土荊皮(金錢松)

石菖蒲

火麻仁

烏藥

牛膽粉

王不留行

赤芍

赤芍(川赤芍)

川木香(川木香)

土木香

金蓮花

山芝麻

地骨皮

雞蛋花

芫花條

藏菖蒲

棉花根