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加樣時(shí)要避免出現(xiàn)氣泡,這到底是什么原因呢?

發(fā)表時(shí)間:2019-11-06 16:47

    通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。很多說明書、教科書上也都提到,加樣時(shí)要避免出現(xiàn)氣泡,這到底是什么原因呢?因?yàn)樵谧鰧?shí)驗(yàn)的過程中,有時(shí)為了打干凈槍頭里面的液體,很容易產(chǎn)生氣泡,是不是這樣對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)后什么影響?

   1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,

    2.孔內(nèi)反應(yīng)不均一。

   3.包被時(shí)有氣泡的話,將導(dǎo)致包被不完全實(shí)際包被量下降--弱陽(yáng)性甚至假陰性。

    4.封閉時(shí)有氣泡的話,將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點(diǎn)的存在,引起非特異性結(jié)合--本底增高,假陽(yáng)性。

    5.加顯色液時(shí)有氣泡的話---顯色不完全。

   6.加終止液時(shí)有氣泡的話(1、不能完全終止反應(yīng) 2、影響酶標(biāo)儀比色,OD值增高)

   7.加樣時(shí)有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽(yáng)性甚至假陰性。

   8.加二抗時(shí)有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽(yáng)性甚至假陰性(競(jìng)爭(zhēng)法相反----假陽(yáng)性)。


    9.洗滌時(shí)有氣泡的話,非特異性結(jié)合物不能完全洗去,做無(wú)用功。


    避免方法:

    1.加樣時(shí)盡量靠近孔底(不要接觸孔底),用力均勻,不要過快過猛。


    2.封閉時(shí)一定要加滿孔,


    3.洗滌時(shí)一定要加滿孔(重要),氣泡會(huì)浮上來*終驅(qū)除。手工洗板時(shí)一定要吸干水分并用力拍干。


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